Princip metody je založen na fotometrickém měření optické hustoty roztoku barevného komplexu vytvořeného interakcí proteinových molekul s molekulami komplexu pyrogallol červeného barviva a molybdenanu sodného (komplex Pyrogallol Red-Molybdate) v kyselém prostředí. Intenzita barvy roztoku je úměrná obsahu proteinu ve studovaném materiálu. Přítomnost detergentů v činidle poskytuje ekvivalentní definici proteinů různé povahy a struktury.
Činidla. 1) 1,5 mmol / l roztoku pyrogallolu červené (PGK): 60 mg PGK rozpuštěného ve 100 ml methanolu. Skladujte při teplotě 0–5 ° C; 2) 50 mmol / l sukcinátového pufru pH 2,5: 5,9 g kyseliny jantarové (HOOC-CH2–СН2–COOH); 0,14 g oxalátu sodného (Na2C2O4) a 0,5 g benzoátu sodného (C.)6H5COONa) se rozpustí v 900 ml destilované vody; 3) 10 mmol / l roztoku krystalohydrátu molybdenanu sodného (Na2Moo4 × 2H2O): 240 mg molybdenanu sodného se rozpustí ve 100 ml destilované vody; 4) Pracovní činidlo: do 900 ml pufrovacího roztoku sukcinátu se přidá 40 ml roztoku PHC a 4 ml roztoku molybdenanu sodného. PH roztoku se upraví na 2,5 roztokem kyseliny chlorovodíkové o koncentraci 0,1 mol / l (HCl) a jeho objem se upraví na 1 litr. Činidlo v této formě je připraveno k použití a je stabilní při skladování na tmavém místě a při teplotě 2–25 ° C po dobu 6 měsíců; 5) 0,5 g / l standardního roztoku albuminu.
Průběh odhodlání. Do první zkumavky se zavede 0,05 ml studované moči, do druhé zkumavky se přidá 0,05 ml standardního roztoku albuminu a do třetí zkumavky (kontrolní vzorek) se přidá 0,05 ml destilované vody a do těchto zkumavek se přidají 3 ml pracovního činidla. Obsah zkumavek se smísí a po 10 minutách se vzorek a standard fotometricky fotí proti kontrolnímu vzorku při vlnové délce 596 nm v kyvetě s délkou optické dráhy 10 mm.
Výpočet koncentrace proteinu v analyzovaném vzorku moči se provádí podle vzorce:
kde C je koncentrace proteinu v analyzovaném vzorku moči, g / l; Apr ast- extinkce studovaného vzorku moči a standardního roztoku albuminu, g / l; 0,5 - koncentrace standardního roztoku albuminu, g / l.
- barva roztoku (barevný komplex) je stabilní po dobu jedné hodiny;
- přímo úměrný vztah mezi koncentrací proteinu ve vzorku a absorpcí roztoku závisí na typu fotometru;
- když je obsah proteinu v moči vyšší než 3 g / l, vzorek se zředí isotonickým roztokem chloridu sodného (9 g / l) a stanovení se opakuje. Při stanovení koncentrace proteinu se bere v úvahu stupeň ředění.
3. Stanovení proteinu.
Princip metody založené na koagulaci proteinu v moči v přítomnosti kyseliny dusičné (nebo 20% roztoku kyseliny sulfosalicylové).
Postup prací: do 5 kapek moči přidejte 1-2 kapky kyseliny dusičné (nebo sulfosalicylové). V přítomnosti proteinu v moči se objeví zákal.
Tabulka Detekce patologických složek moči.
Poznámka: v přítomnosti glukózy a proteinu ve vyšetřené moči se stanoví jejich kvantitativní obsah.
Kvantitativní stanovení proteinu v moči kolorimetrickou metodou s pyrogallolem red.
Princip metodyKdyž protein interaguje s pyrogallolem a molybdenanem sodným, vytvoří se barevný komplex, intenzita barev, která je úměrná koncentraci proteinu ve vzorku.
Činidla: Pracovní činidlo - roztok červeného pyrogalolu v sukcinátovém pufru, kalibrační roztok proteinu o koncentraci 0,50 g / l
Vzorky se míchají, počkejte 10 minut. při teplotě místnosti (18-25 ° C). Změřte zaznamenanou optickou hustotu (Dop) a kalibrační vzorek (D. tto) proti kontrolnímu vzorku při A = 598 (578-610) nm. Barvení je stabilní po dobu 1 hodiny.
Výpočet: koncentrace proteinu v moči (C) g / l se vypočte podle vzorce:
Normální hodnoty: až 0,094 g / l, (0,141 g / den)
Kvantitativní stanovení glukózy v moči metodou glukózaoxidázy.
Princip metodyKdyž je D-glukóza oxidována atmosférickým kyslíkem za působení oxidázy glukózy, vytvoří se ekvimolární množství peroxidu vodíku. Při působení peroxidázy oxiduje peroxid vodíku chromogenní substráty (směs fenolu a 4 aminoantipirinu - 4 ° C) s tvorbou barevného produktu. Intenzita barvy je úměrná obsahu glukózy.
2 N2Oh2 + fenol + 4АА barevné sloučeniny + 4Н2Oh
Postup prací1 ml pracovního roztoku a 0,5 ml fosfátového pufru se zavede do dvou zkumavek. Do první zkumavky se přidá 0,02 ml moči a ke druhé se přidá 0,02 ml kalibrátoru (kalibrace, standardní roztok glukózy, 10 mmol / l). Vzorky se smísí, inkubují se 15 minut při teplotě 37 ° C v termostatu a optická hustota se měří experimentálně (Dop) a kalibraci (Dto) vzorky proti pracovnímu činidlu při vlnové délce 500-546 nm.
Obsah glukózy v denní moči je stanoven mmol / den vynásobením výsledku získaného objemem odebrané moči denně.
Poznámka Pokud je obsah cukru v moči vyšší než 1%, musí být zředěn.
V současné době používají biochemické laboratoře jednotnou expresní metodu pro analýzu moči glukózy za použití glukózového testu s reaktivním glukózovým testem nebo pomocí kombinovaných testovacích proužků pro PH, bílkoviny, glukózu, tělíska ketonu a krev. Testovací proužky, ponořené do nádoby s močí po dobu 1 sekundy. a porovnejte barvu na stupnici.
Léčíme játra
Léčba, symptomy, léky
Pyrogalický červený protein v moči
02.26.2009
Kurilyak O.A., Ph.D.
Obvykle se protein vylučuje močí v relativně malém množství, obvykle ne více než 100–150 mg / den.
Denní diuréza u zdravého člověka je 1000-1500 ml / den; koncentrace proteinu za fyziologických podmínek je tedy 8–10 mg / dl (0,08–0,1 g / l).
Celkové bílkoviny moči představují tři hlavní frakce - albumin, mukoproteiny a globuliny.
Albumin moči je podíl sérového albuminu, který byl filtrován v glomerulech a nebyl reabsorbován v renálních tubulech; Normální vylučování albuminu močí je nižší než 30 mg / den. Dalším významným zdrojem proteinu v moči jsou renální tubuly, zejména distální část tubulů. Tyto tubuly vylučují dvě třetiny celkového množství proteinů v moči; přibližně 50% tohoto množství představuje glykoprotein Tamm-Horsfall, který je vylučován epitelem distálních tubulů a hraje důležitou roli při tvorbě močových kamenů. Jiné proteiny jsou přítomny v moči v malých množstvích a pocházejí z nízkomolekulárních plazmatických proteinů filtrovaných přes ledvinový filtr, které nejsou reabsorbovány v renálních tubulech, mikroglobuliny z epitelu renálních tubulů (RTE), stejně jako prostatické a vaginální výtok.
Proteinurie, tj. Zvýšení obsahu bílkovin v moči je jedním z nejvýznamnějších symptomů odrážejících poškození ledvin. Řada dalších stavů však může být také doprovázena proteinurií. Proto existují dvě hlavní skupiny proteinurie: renální (true) a extrarenální (falešná) proteinurie.
V renální proteinurii protein vstupuje do moči přímo z krve v důsledku zvýšení permeability glomerulárního filtru. Renální proteinurie se často vyskytuje v glomerulonefritidě, nefróze, pyelonefritidě, nefroskleróze, amyloidóze ledvin, různých formách nefropatie, například nefropatie těhotných žen, horečnatých stavech, hypertenzi atd. Proteinurii lze také nalézt u zdravých lidí po těžké fyzické námaze, podchlazení a psychickém stresu. U novorozenců je v prvních týdnech života pozorována fyziologická proteinurie a když se astenie objeví u dětí a dospívajících, je možná ortostatická proteinurie (ve vzpřímené poloze těla) v kombinaci s rychlým růstem ve věku 7 až 18 let.
V případě falešné (extrarenální) proteinurie je zdrojem proteinu v moči příměs leukocytů, erytrocytů, epiteliálních buněk urothelia močového traktu. Rozpad těchto prvků, zvláště výrazný alkalickou močí, vede k pronikání proteinu do moči, která již prošla ledvinovým filtrem. Obzvláště vysoký stupeň falešné proteinurie dává krev v moči, s bohatou hematurií, může dosáhnout 30 g / l a více. Nemoci, které mohou být doprovázeny extrarenální proteinurií - urolitiázou, tuberkulózou ledvin, nádory ledvin nebo močových cest, cystitidou, pyelitidou, prostatitidou, uretritidou, vulvovaginitidou.
Klinická klasifikace zahrnuje lehkou proteinurii (méně než 0,5 g / den), mírnou (od 0,5 do 4 g / den) nebo závažnou (více než 4 g / den).
Většina pacientů s onemocněním ledvin, jako je akutní glomerulonefritida nebo pyelonefritida, odhalí mírnou proteinurii, ale pacienti s nefrotickým syndromem obvykle vylučují denně více než 4 g proteinu v moči.
Pro kvantitativní stanovení proteinu se používá široká škála metod, zejména sjednocená Brandberg-Robertsova-Stolnikovova metoda, biuretová metoda, metoda kyseliny sulfosalicylové, metody využívající barviva Coomassie blue, pyrogallol red dye, atd.
Použití různých metod pro stanovení proteinu v moči vedlo k vážnému zmatku ve výkladu limitů normy obsahu bílkovin v moči. Vzhledem k tomu, že v laboratořích se nejčastěji používají 2 metody - s kyselinou sulfosalicylovou a pyrogallolovým červeným barvivem, zvažujeme problém správnosti hranic norem pro ně. Z hlediska sulfosalicylové metody v normální moči by obsah bílkovin neměl překročit 0,03 g / l, az hlediska pyrogallolu 0,1 g / l! Rozdíly jsou trojí.
Nízké hodnoty normální koncentrace proteinů v moči při použití sulfosalicylové vzhledem k následujícím bodům:
- kalibrační křivka je založena na vodném roztoku albuminu. Moč ve svém složení je velmi odlišný od vody: pH, sůl, sloučeniny s nízkou molekulovou hmotností (kreatinin, močovina atd.). Jako výsledek, podle Altshuler, Rakov a Tkachev, chyba při stanovení bílkoviny moči může být 3 krát nebo více! Tj správných výsledků stanovení lze dosáhnout pouze v případech, kdy má moč velmi nízkou měrnou hmotnost a její složení a pH se blíží vodě;
- vyšší citlivost sulfosalicylové metody na albumin ve srovnání s jinými proteiny (v té době, jak bylo zmíněno výše, albumin v normálních vzorcích moči tvoří ne více než 30% celkového obsahu moči);
- jestliže je pH moči posunuto na alkalickou stranu, kyselina sulfosalicylová je neutralizována, což také způsobuje snížení výsledků stanovení proteinu;
- míra sedimentace precipitátů podléhá výrazným změnám - při nízkých koncentracích proteinů dochází ke zpomalení srážení a včasné ukončení reakce vede k podhodnocení výsledku;
- rychlost srážení v podstatě závisí na smíchání reakční směsi. Při vysokých koncentracích proteinu může intenzivní třepání trubice vést k tvorbě velkých vloček a jejich rychlému srážení.
Všechny výše uvedené znaky způsobu vedou k významnému podcenění koncentrace proteinu stanovené v moči. Stupeň nedostatečného podávání silně závisí na složení konkrétního vzorku moči. Vzhledem k tomu, že způsob sulfosalicylové kyseliny dává podceněnou hodnotu koncentrace proteinu, je normální limit pro tuto metodu také 0,03 g / l, také přibližně třikrát nižší ve srovnání s údaji uvedenými v zahraničních referenčních knihách o klinické laboratorní diagnostice.
Drtivá většina laboratoří v západních zemích upustila od použití sulfosalicylic metody pro stanovení koncentrace bílkoviny v moči a aktivně používat pyrogallol metodu pro tento účel. Metoda pyrogallolu pro stanovení koncentrace proteinu v moči a dalších biologických tekutinách je založena na fotometrickém principu měření optické hustoty barevného komplexu vytvořeného interakcí molekul bílkovin s pyrogallolovým červeným barvivem a komplexními molekulami molybdenanu sodného (komplex Pyrogallol Red - Molybdate).
Proč pyrogallolová metoda umožňuje získat přesnější výsledky měření koncentrace bílkovin v moči? Za prvé, vzhledem k většímu množství ředění vzorků moči v reakční směsi. Je-li v metodě sulfosalicylů poměr vzorku moči / činidla 1/3, pak v metodě pyrogalolu může být v rozmezí od 1 / 12,5 do 1/60, v závislosti na variantě techniky, což významně snižuje účinek složení moči na výsledek měření. Za druhé, reakce probíhá v sukcinátovém pufru, to znamená při stabilním pH. A konečně, samotný princip metody lze říci, že je „transparentnější“. Molybdenan sodný a pyrogallolové červené barvivo tvoří komplex s molekulou proteinu. To vede ke skutečnosti, že molekuly barviva ve volném stavu, které neabsorbují světlo při vlnové délce 600 nm v kombinaci s proteinem absorbujícím světlo. Zdá se tedy, že každou molekulu proteinu označíme barvivem a v důsledku toho zjistíme, že změna optické hustoty reakční směsi při vlnové délce 600 nm jasně koreluje s koncentrací proteinu v moči. Navíc, protože afinita pyrogallolu k různým proteinovým frakcím je téměř stejná, metoda umožňuje stanovit celkový protein moči. Limit normálních hodnot koncentrace bílkovin v moči je proto 0,1 g / l (je to uvedeno ve všech moderních západních pokynech pro klinickou a laboratorní diagnostiku, včetně „Klinické příručky pro laboratorní testy“, kterou upravil N. Titsa). Srovnávací charakteristiky pyrogallolových a sulfosalicylových metod pro stanovení proteinů v moči jsou uvedeny v tabulce 1.
Závěrem bych se chtěl opět zaměřit na skutečnost, že když laboratoř vychází ze sulfosalicylové metody pro stanovení proteinů moči k pyrogallolové metodě, limit normálních hodnot se významně zvyšuje (z 0,03 g / l na 0,1 g / l!). Tento personál laboratoře by měl určitě informovat lékaře, protože V této situaci může být diagnóza proteinurie provedena pouze v případě, kdy obsah proteinu v moči překročí 0,1 g / l.
Léčíme játra
Léčba, symptomy, léky
Stanovení bílkoviny pyrogallolem v moči
02.26.2009
Kurilyak O.A., Ph.D.
Obvykle se protein vylučuje močí v relativně malém množství, obvykle ne více než 100–150 mg / den.
Denní diuréza u zdravého člověka je 1000-1500 ml / den; koncentrace proteinu za fyziologických podmínek je tedy 8–10 mg / dl (0,08–0,1 g / l).
Celkové bílkoviny moči představují tři hlavní frakce - albumin, mukoproteiny a globuliny.
Albumin moči je podíl sérového albuminu, který byl filtrován v glomerulech a nebyl reabsorbován v renálních tubulech; Normální vylučování albuminu močí je nižší než 30 mg / den. Dalším významným zdrojem proteinu v moči jsou renální tubuly, zejména distální část tubulů. Tyto tubuly vylučují dvě třetiny celkového množství proteinů v moči; přibližně 50% tohoto množství představuje glykoprotein Tamm-Horsfall, který je vylučován epitelem distálních tubulů a hraje důležitou roli při tvorbě močových kamenů. Jiné proteiny jsou přítomny v moči v malých množstvích a pocházejí z nízkomolekulárních plazmatických proteinů filtrovaných přes ledvinový filtr, které nejsou reabsorbovány v renálních tubulech, mikroglobuliny z epitelu renálních tubulů (RTE), stejně jako prostatické a vaginální výtok.
Proteinurie, tj. Zvýšení obsahu bílkovin v moči je jedním z nejvýznamnějších symptomů odrážejících poškození ledvin. Řada dalších stavů však může být také doprovázena proteinurií. Proto existují dvě hlavní skupiny proteinurie: renální (true) a extrarenální (falešná) proteinurie.
V renální proteinurii protein vstupuje do moči přímo z krve v důsledku zvýšení permeability glomerulárního filtru. Renální proteinurie se často vyskytuje v glomerulonefritidě, nefróze, pyelonefritidě, nefroskleróze, amyloidóze ledvin, různých formách nefropatie, například nefropatie těhotných žen, horečnatých stavech, hypertenzi atd. Proteinurii lze také nalézt u zdravých lidí po těžké fyzické námaze, podchlazení a psychickém stresu. U novorozenců je v prvních týdnech života pozorována fyziologická proteinurie a když se astenie objeví u dětí a dospívajících, je možná ortostatická proteinurie (ve vzpřímené poloze těla) v kombinaci s rychlým růstem ve věku 7 až 18 let.
V případě falešné (extrarenální) proteinurie je zdrojem proteinu v moči příměs leukocytů, erytrocytů, epiteliálních buněk urothelia močového traktu. Rozpad těchto prvků, zvláště výrazný alkalickou močí, vede k pronikání proteinu do moči, která již prošla ledvinovým filtrem. Obzvláště vysoký stupeň falešné proteinurie dává krev v moči, s bohatou hematurií, může dosáhnout 30 g / l a více. Nemoci, které mohou být doprovázeny extrarenální proteinurií - urolitiázou, tuberkulózou ledvin, nádory ledvin nebo močových cest, cystitidou, pyelitidou, prostatitidou, uretritidou, vulvovaginitidou.
Klinická klasifikace zahrnuje lehkou proteinurii (méně než 0,5 g / den), mírnou (od 0,5 do 4 g / den) nebo závažnou (více než 4 g / den).
Většina pacientů s onemocněním ledvin, jako je akutní glomerulonefritida nebo pyelonefritida, odhalí mírnou proteinurii, ale pacienti s nefrotickým syndromem obvykle vylučují denně více než 4 g proteinu v moči.
Pro kvantitativní stanovení proteinu se používá široká škála metod, zejména sjednocená Brandberg-Robertsova-Stolnikovova metoda, biuretová metoda, metoda kyseliny sulfosalicylové, metody využívající barviva Coomassie blue, pyrogallol red dye, atd.
Použití různých metod pro stanovení proteinu v moči vedlo k vážnému zmatku ve výkladu limitů normy obsahu bílkovin v moči. Vzhledem k tomu, že v laboratořích se nejčastěji používají 2 metody - s kyselinou sulfosalicylovou a pyrogallolovým červeným barvivem, zvažujeme problém správnosti hranic norem pro ně. Z hlediska sulfosalicylové metody v normální moči by obsah bílkovin neměl překročit 0,03 g / l, az hlediska pyrogallolu 0,1 g / l! Rozdíly jsou trojí.
Nízké hodnoty normální koncentrace proteinů v moči při použití sulfosalicylové vzhledem k následujícím bodům:
- kalibrační křivka je založena na vodném roztoku albuminu. Moč ve svém složení je velmi odlišný od vody: pH, sůl, sloučeniny s nízkou molekulovou hmotností (kreatinin, močovina atd.). Jako výsledek, podle Altshuler, Rakov a Tkachev, chyba při stanovení bílkoviny moči může být 3 krát nebo více! Tj správných výsledků stanovení lze dosáhnout pouze v případech, kdy má moč velmi nízkou měrnou hmotnost a její složení a pH se blíží vodě;
- vyšší citlivost sulfosalicylové metody na albumin ve srovnání s jinými proteiny (v té době, jak bylo zmíněno výše, albumin v normálních vzorcích moči tvoří ne více než 30% celkového obsahu moči);
- jestliže je pH moči posunuto na alkalickou stranu, kyselina sulfosalicylová je neutralizována, což také způsobuje snížení výsledků stanovení proteinu;
- míra sedimentace precipitátů podléhá výrazným změnám - při nízkých koncentracích proteinů dochází ke zpomalení srážení a včasné ukončení reakce vede k podhodnocení výsledku;
- rychlost srážení v podstatě závisí na smíchání reakční směsi. Při vysokých koncentracích proteinu může intenzivní třepání trubice vést k tvorbě velkých vloček a jejich rychlému srážení.
Všechny výše uvedené znaky způsobu vedou k významnému podcenění koncentrace proteinu stanovené v moči. Stupeň nedostatečného podávání silně závisí na složení konkrétního vzorku moči. Vzhledem k tomu, že způsob sulfosalicylové kyseliny dává podceněnou hodnotu koncentrace proteinu, je normální limit pro tuto metodu také 0,03 g / l, také přibližně třikrát nižší ve srovnání s údaji uvedenými v zahraničních referenčních knihách o klinické laboratorní diagnostice.
Drtivá většina laboratoří v západních zemích upustila od použití sulfosalicylic metody pro stanovení koncentrace bílkoviny v moči a aktivně používat pyrogallol metodu pro tento účel. Metoda pyrogallolu pro stanovení koncentrace proteinu v moči a dalších biologických tekutinách je založena na fotometrickém principu měření optické hustoty barevného komplexu vytvořeného interakcí molekul bílkovin s pyrogallolovým červeným barvivem a komplexními molekulami molybdenanu sodného (komplex Pyrogallol Red - Molybdate).
Proč pyrogallolová metoda umožňuje získat přesnější výsledky měření koncentrace bílkovin v moči? Za prvé, vzhledem k většímu množství ředění vzorků moči v reakční směsi. Je-li v metodě sulfosalicylů poměr vzorku moči / činidla 1/3, pak v metodě pyrogalolu může být v rozmezí od 1 / 12,5 do 1/60, v závislosti na variantě techniky, což významně snižuje účinek složení moči na výsledek měření. Za druhé, reakce probíhá v sukcinátovém pufru, to znamená při stabilním pH. A konečně, samotný princip metody lze říci, že je „transparentnější“. Molybdenan sodný a pyrogallolové červené barvivo tvoří komplex s molekulou proteinu. To vede ke skutečnosti, že molekuly barviva ve volném stavu, které neabsorbují světlo při vlnové délce 600 nm v kombinaci s proteinem absorbujícím světlo. Zdá se tedy, že každou molekulu proteinu označíme barvivem a v důsledku toho zjistíme, že změna optické hustoty reakční směsi při vlnové délce 600 nm jasně koreluje s koncentrací proteinu v moči. Navíc, protože afinita pyrogallolu k různým proteinovým frakcím je téměř stejná, metoda umožňuje stanovit celkový protein moči. Limit normálních hodnot koncentrace bílkovin v moči je proto 0,1 g / l (je to uvedeno ve všech moderních západních pokynech pro klinickou a laboratorní diagnostiku, včetně „Klinické příručky pro laboratorní testy“, kterou upravil N. Titsa). Srovnávací charakteristiky pyrogallolových a sulfosalicylových metod pro stanovení proteinů v moči jsou uvedeny v tabulce 1.
Závěrem bych se chtěl opět zaměřit na skutečnost, že když laboratoř vychází ze sulfosalicylové metody pro stanovení proteinů moči k pyrogallolové metodě, limit normálních hodnot se významně zvyšuje (z 0,03 g / l na 0,1 g / l!). Tento personál laboratoře by měl určitě informovat lékaře, protože V této situaci může být diagnóza proteinurie provedena pouze v případě, kdy obsah proteinu v moči překročí 0,1 g / l.
Doktor Hepatitida
léčení jater
Normální protein v pyrogallolové metodě v moči
Zdravý člověk denně produkuje 1,0–1,5 litru moči. Obsah 8 - 10 mg / dl proteinu je fyziologický jev. Denní příjem bílkovin v moči 100-150 mg by neměl vyvolat podezření. Globulin, mukoprotein a albumin tvoří to, co tvoří celkový protein v moči. Velký odtok albuminu indikuje porušení filtračního procesu v ledvinách a nazývá se proteinurie nebo albuminurie.
Každá látka v moči dostane "zdravou" rychlost a pokud index bílkovin kolísá, může to znamenat patologii ledvin.
Analýza moči zahrnuje použití první (ranní) porce nebo denní vzorek. Ta je výhodnější pro stanovení hladiny proteinurie, protože obsah proteinů má výrazné denní výkyvy. Moč během dne se shromažďuje v jednom kontejneru, měří se celkový objem. Pro laboratoř, která provádí analýzu proteinů v moči, postačuje standardní vzorek (od 50 do 100 ml) z této nádoby, zbývající množství není nutné. Pro více informací, další test se provádí na Zimnitsky, který ukazuje, zda jsou ukazatele moči za den normální.
Zpět na obsah
Protein v moči je u dospělého normální a nesmí překročit 0,033 g / l. Současně není denní rychlost vyšší než 0,05 g / l. U těhotných žen je množství bílkovin v denní moči více - 0,3 g / l. A ráno je moč stejný - 0,033 g / l. Standardy proteinů se liší v obecné analýze moči a dětí: 0,036 g / l pro ranní porci a 0,06 g / l denně. Nejčastěji laboratoře provádějí analýzu pomocí dvou metod, které ukazují, kolik proteinové frakce je obsaženo v moči. Výše uvedené normální hodnoty platí pro analýzu provedenou s kyselinou sulfosalicylovou. Pokud se použije pyrogallolové červené barvivo, hodnoty budou třikrát odlišné.
Zpět na obsah
Příčinou bílkovin v moči mohou být patologické procesy v ledvinách:
- filtrace v glomerulech ledvin jde špatně;
- absorpce v proteinových tubulech je narušena;
- Některé nemoci mají silnou zátěž na ledviny - když je bílkovina v krvi zvýšená, ledviny nemají čas ji filtrovat.
Zbývající důvody jsou považovány za ledviny. Takto se vyvíjí funkční albuminurie. Protein v analýze moči se objevuje u alergických reakcí, epilepsie, srdečního selhání, leukémie, otravy, myelomu, chemoterapie, systémových onemocnění. Více často než ne, takový ukazatel v pacientových analýzách bude první zvon hypertonické nemoci.
Zvýšení hladiny bílkovin v moči může být způsobeno faktory nepatologického charakteru, proto budou nutné další analýzy.
Kvantitativní metody stanovení bílkovin v moči dávají chyby, proto se doporučuje provést několik analýz a pak použít vzorec pro výpočet správné hodnoty. Obsah bílkovin v moči se měří vg / l nebo mg / l. Tyto indikátory proteinu umožňují stanovit úroveň proteinurie, navrhnout příčinu, odhadnout prognózu a určit strategii.
Zpět na obsah
Pro plné fungování těla vyžaduje neustálou výměnu mezi krví a tkáněmi. Je to možné pouze tehdy, je-li v cévách určitý osmotický tlak. Proteiny krevní plazmy udržují takovou úroveň tlaku, kdy nízkomolekulární látky snadno přecházejí z média s vysokou koncentrací do média s nižší koncentrací. Ztráta molekul proteinu vede k uvolnění krve z jejího lůžka do tkáně, která je plná silného edému. To je projev střední a těžké proteinurie.
Počáteční stadia albuminurie jsou asymptomatická. Pacient věnuje pozornost pouze projevům základního onemocnění, které je příčinou bílkovin v moči.
Stopová proteinurie se nazývá zvýšení hladiny bílkovin v moči v důsledku použití určitých přípravků.
Moč pro analýzu se shromažďuje v čisté, odstředěné nádobě. Před sběrem je toaleta zobrazena perineum, musíte se umýt mýdlem a vodou. Ženám se doporučuje zavřít vaginu kouskem bavlny nebo tamponu, aby výtok z pošvy neovlivnil výsledek. V předvečer je lepší nepít alkohol, minerální vodu, kávu, kořeněnou, slanou a potraviny, které dávají moči barvu (borůvky, řepa). Silná fyzická námaha, dlouhá chůze, stres, horečka a pocení, nadměrná konzumace bílkovinných potravin nebo léků před podáním moči vyvolávají výskyt bílkovin v analýze moči zcela zdravé osoby. Tento přípustný jev se nazývá stopová proteinurie.
Zpět na obsah
Onemocnění ledvin vedoucí ke ztrátě bílkovin:
- Amyloidóza. Normální buňky v ledvinách jsou nahrazeny amyloidy (komplex protein-sacharid), který zabraňuje normálnímu fungování organismu. V proteinurickém stadiu se amyloidy ukládají do ledvinových tkání, ničí nefron a v důsledku toho ledvinový filtr. Protein se tak dostává z krve do moči. Tato fáze může trvat déle než 10 let.
- Diabetická nefropatie. V důsledku nesprávného metabolismu uhlohydrátů a lipidů jsou zničeny cévy, glomeruly a tubuly v ledvinách. Protein v moči je prvním příznakem předvídatelné komplikace diabetu.
- Nemoci zánětlivé geneze - nefritida. Léze nejčastěji postihují krevní cévy, glomeruly a prsní-pánevní systémy, což narušuje normální průběh filtračního systému.
- Glomerulonefritida je ve většině případů autoimunitní povahy. Pacient si stěžuje na snížení množství moči, bolesti dolní části zad a zvýšení tlaku. Pro léčbu glomerulonefritidy doporučujeme dietu, režim a léky.
- Pyelonefritida. V akutním období dochází k příznakům bakteriální infekce: zimnice, nevolnost, bolest hlavy. To je infekční onemocnění.
- Polycystická choroba ledvin.
Ve zdravém těle molekuly bílkovin (a jejich velikost je poměrně velká) nejsou schopny projít filtračním systémem ledvin. Proto by protein v moči neměl být. Tento ukazatel je stejný pro muže i ženy. Pokud analýza ukazuje proteinurii, je důležité poradit se s lékařem, abyste zjistili příčiny. Specialista odhadne, jak vysoká je hladina bílkovin, ať už je to souběžné patologie, jak obnovit normální fungování těla. Podle statistik má žena vyšší riziko urogenitální nemoci než muž.
Princip metody založené na koagulaci proteinu v moči v přítomnosti kyseliny dusičné (nebo 20% roztoku kyseliny sulfosalicylové).
Postup prací: do 5 kapek moči přidejte 1-2 kapky kyseliny dusičné (nebo sulfosalicylové). V přítomnosti proteinu v moči se objeví zákal.
Tabulka Detekce patologických složek moči.
Poznámka: v přítomnosti glukózy a proteinu ve vyšetřené moči se stanoví jejich kvantitativní obsah.
Princip metodyKdyž protein interaguje s pyrogallolem a molybdenanem sodným, vytvoří se barevný komplex, intenzita barev, která je úměrná koncentraci proteinu ve vzorku.
Činidla: Pracovní činidlo - roztok červeného pyrogalolu v sukcinátovém pufru, kalibrační roztok proteinu o koncentraci 0,50 g / l
Vzorky se míchají, počkejte 10 minut. při teplotě místnosti (18-25 ° C). Změřte optickou hustotu experimentálního (Dop) a kalibračního vzorku (Dk) proti kontrolnímu vzorku při A = 598 (578-610) nm. Barvení je stabilní po dobu 1 hodiny.
Výpočet: koncentrace proteinu v moči (C) g / l se vypočte podle vzorce:
kde: Dop = Dk = C = g / l.
Normální hodnoty: až 0,094 g / l, (0,141 g / den)
Princip metodyKdyž je D-glukóza oxidována atmosférickým kyslíkem za působení oxidázy glukózy, vytvoří se ekvimolární množství peroxidu vodíku. Při působení peroxidázy oxiduje peroxid vodíku chromogenní substráty (směs fenolu a 4 aminoantipirinu - 4 ° C) s tvorbou barevného produktu. Intenzita barvy je úměrná obsahu glukózy.
Glukóza + O2 + H20 glukonolakton + H202
2H202 + fenol + 4AAP zbarvená sloučenina + 4H20
Postup prací1 ml pracovního roztoku a 0,5 ml fosfátového pufru se zavede do dvou zkumavek. Do první zkumavky se přidá 0,02 ml moči a ke druhé se přidá 0,02 ml kalibrátoru (kalibrace, standardní roztok glukózy, 10 mmol / l). Vzorky jsou smíchány, inkubovány po dobu 15 minut při teplotě 37 ° C v termostatu a optická hustota experimentálních (Dop) a kalibračních (Dk) vzorků proti pracovnímu činidlu je měřena při vlnové délce 500-546 nm.
Výpočet: C = Dop / Dk 10 mmol / l Dop = Dk =
Obsah glukózy v denní moči je stanoven mmol / den vynásobením výsledku získaného objemem odebrané moči denně.
Poznámka Pokud je obsah cukru v moči vyšší než 1%, musí být zředěn.
V současné době používají biochemické laboratoře jednotnou expresní metodu pro analýzu moči glukózy za použití glukózového testu s reaktivním glukózovým testem nebo pomocí kombinovaných testovacích proužků pro PH, bílkoviny, glukózu, tělíska ketonu a krev. Testovací proužky, ponořené do nádoby s močí po dobu 1 sekundy. a porovnejte barvu na stupnici.
Stanovení bílkoviny pomocí pyrogallol červeného indikátoru
Princip metody je založen na fotometrickém měření optické hustoty roztoku barevného komplexu vytvořeného interakcí proteinových molekul s molekulami komplexu pyrogallol červeného barviva a molybdenanu sodného (komplex Pyrogallol Red-Molybdate) v kyselém prostředí. Intenzita barvy roztoku je úměrná obsahu proteinu ve studovaném materiálu. Přítomnost detergentů v činidle poskytuje ekvivalentní definici proteinů různé povahy a struktury.
Činidla. 1) 1,5 mmol / l roztoku pyrogallolu červené (PGK): 60 mg PGK rozpuštěného ve 100 ml methanolu. Skladujte při teplotě 0–5 ° C; 2) 50 mmol / l roztoku jantarového pufru pH 2,5: 5,9 g kyseliny jantarové (HOOC-CH2-CH2-COOH); 0,14 g oxalátu sodného (Na2C204) a 0,5 g benzoátu sodného (C6H5COONa) se rozpustí v 900 ml destilované vody; 3) 10 mol / l roztok krystalického hydrátu molybdenanu sodného (Na2MoO4 × 2H20): 240 mg molybdenanu sodného se rozpustí ve 100 ml destilované vody; 4) Pracovní činidlo: do 900 ml pufrovacího roztoku sukcinátu se přidá 40 ml roztoku PHC a 4 ml roztoku molybdenanu sodného. PH roztoku se upraví na 2,5 roztokem kyseliny chlorovodíkové o koncentraci 0,1 mol / l (HCl) a jeho objem se upraví na 1 litr. Činidlo v této formě je připraveno k použití a je stabilní při skladování na tmavém místě a při teplotě 2–25 ° C po dobu 6 měsíců; 5) 0,5 g / l standardního roztoku albuminu.
Průběh odhodlání. Do první zkumavky se zavede 0,05 ml studované moči, do druhé zkumavky se přidá 0,05 ml standardního roztoku albuminu a do třetí zkumavky (kontrolní vzorek) se přidá 0,05 ml destilované vody a do těchto zkumavek se přidají 3 ml pracovního činidla. Obsah zkumavek se smísí a po 10 minutách se vzorek a standard fotometricky fotí proti kontrolnímu vzorku při vlnové délce 596 nm v kyvetě s délkou optické dráhy 10 mm.
Výpočet koncentrace proteinu v analyzovaném vzorku moči se provádí podle vzorce:
C = 0,5 × Apr / Ast,
kde C je koncentrace proteinu v analyzovaném vzorku moči, g / l; Apr a Ast - extinkce vyšetřovaného vzorku moči a standardního roztoku albuminu, g / l; 0,5 - koncentrace standardního roztoku albuminu, g / l.
- barva roztoku (barevný komplex) je stabilní po dobu jedné hodiny;
- přímo úměrný vztah mezi koncentrací proteinu ve vzorku a absorpcí roztoku závisí na typu fotometru;
- když je obsah proteinu v moči vyšší než 3 g / l, vzorek se zředí isotonickým roztokem chloridu sodného (9 g / l) a stanovení se opakuje. Při stanovení koncentrace proteinu se bere v úvahu stupeň ředění.
- Stanovení proteinů v moči
- Sjednocená zkouška kyseliny sulfosalicylové
- Sjednocená Brandberg - Roberts - Stolnikov metoda
- Stanovení množství proteinu v moči reakcí s kyselinou sulfosalicylovou
- Metoda Biuret
- Detekce v moči Bens - Jonesova proteinu
Proteinurie - jev, ve kterém je protein detekován v moči, což indikuje možnost poškození ledvin, je faktorem ve vývoji srdečních onemocnění, cév, lymfatických cév.
Detekce proteinu v moči neznamená vždy onemocnění. Podobný jev je typický i pro naprosto zdravé lidi, u kterých je možné detekovat protein moči. Hypotermie, fyzická námaha, konzumace proteinových potravin vede k vzniku bílkovin v moči, které zmizí bez jakékoli léčby.
Během screeningu, 17% prakticky zdravých lidí určuje protein, ale pouze 2% z tohoto počtu lidí vykazuje pozitivní výsledek testu jako projev onemocnění ledvin.
Proteinové molekuly by neměly vstupovat do krve. Jsou životně důležité pro tělo - jsou stavebním materiálem pro buňky, účastní se reakcí jako koenzymy, hormony, protilátky. U mužů i žen je míra úplná absence bílkovin v moči.
Funkce prevence ztráty proteinových molekul tělem je prováděna ledvinami.
Dva filtry ledvin jsou zapojeny do filtrace moči:
- glomeruly - nenechávejte ve velkých molekulách, ale nezachovávejte albumin, globuliny - malou frakci molekul proteinu;
- renální tubuly - adsorbují proteiny filtrované glomeruly, vracejí se zpět do oběhového systému.
Albumin (asi 49%), mukoproteiny, globuliny se nacházejí v moči, z čehož podíl imunoglobulinů představuje přibližně 20%.
Globuliny - syrovátkové proteiny s vysokou molekulovou hmotností, které jsou produkovány v imunitním systému av játrech. Většina z nich je syntetizována imunitním systémem, označuje imunoglobuliny nebo protilátky.
Albuminy jsou frakcí proteinů, které se poprvé objevují v moči i při menším poškození ledvin. Ve zdravé moči je nějaký albumin, ale není tak významné, že jej nelze zjistit pomocí laboratorní diagnostiky.
Dolní práh, který lze zjistit pomocí laboratorní diagnostiky, je 0,033 g / l. Pokud se denně ztrácí více než 150 mg proteinu, hovoří o proteinurii.
Základní informace o proteinu v moči
Nemoc s mírnou proteinurií je asymptomatická. Vizuálně nelze moč bez bílkovin odlišit od moči, ve které je malé množství proteinu. Několik pěnivých močí je již s vysokým stupněm proteinurie.
Aktivní vylučování proteinu v moči je možné předpokládat pouze u pacienta s mírným nebo závažným stupněm onemocnění v důsledku výskytu otoků končetin, obličeje, břicha.
V počátečních stadiích onemocnění mohou být nepřímé příznaky proteinurie následující:
- zabarvení moči;
- rostoucí slabost;
- nedostatek chuti k jídlu;
- nevolnost, zvracení;
- bolest kostí;
- ospalost, závratě;
- zvýšená teplota.
Vzhled těchto příznaků nelze ignorovat, zejména během těhotenství. To může znamenat mírnou odchylku od normy a může být příznakem vzniku preeklampsie, preeklampsie.
Kvantitativní posouzení ztráty bílkovin není snadný úkol, pro dosažení úplnějšího obrazu o stavu pacienta se používá několik laboratorních testů.
Obtíže při výběru metody detekce nadbytečného proteinu v moči jsou vysvětleny:
- nízká koncentrace bílkovin, která vyžaduje vysoce přesné přístroje pro rozpoznání;
- složení moči, komplikuje úkol, protože obsahuje látky, které narušují výsledek.
Největší informace poskytuje analýza první ranní moči, která se shromažďuje po probuzení.
V předvečer analýzy musí být splněny následující podmínky:
- Nejezte pikantní, smažené, proteinové potraviny, alkohol;
- vyloučit diuretikum po dobu 48 hodin;
- omezit fyzickou aktivitu;
- pečlivě dodržovat pravidla osobní hygieny.
Ranní moč je nejvíce informativní, protože je dlouhodobě v močovém měchýři, méně závislý na příjmu potravy.
Je možné analyzovat množství proteinu v moči náhodnou částí, která je odebrána kdykoliv, ale tato analýza je méně informativní, čím vyšší je pravděpodobnost chyby.
Pro kvantifikaci denní ztráty proteinů se provádí celková denní analýza moči. K tomu, do 24 hodin shromážděných ve speciální plastové nádobě všechny moči přidělené na den. Sbírání můžete začít kdykoliv. Hlavní podmínka - přesně v den odběru.
Kvalitativní definice proteinurie je založena na denaturaci proteinu fyzikálními nebo chemickými faktory. Kvalitativní metody se týkají screeningu, který umožňuje stanovit přítomnost proteinu v moči, ale neposkytuje možnost přesně posoudit stupeň proteinurie.
Použité vzorky:
- s varem;
- kyselina sulfosalicylová;
- kyselina dusičná, činidlo Larionic ve vzorku Hellerova kruhu.
Vzorek se kyselinou sulfosalicylovou se provádí porovnáním kontrolního vzorku moči se zkušeným vzorkem, do kterého se do moči přidá 7 až 8 kapek 20% kyseliny sulfosalicylové. Závěr o přítomnosti proteinu se provádí podle intenzity opalescentní zákalu, která se objeví v zkumavce během reakce.
Běžněji se používá Gellerův test s použitím 50% kyseliny dusičné. Citlivost metody je 0,033 g / l. Při této koncentraci proteinu ve zkumavce se vzorkem moči a činidlem po dobu 2-3 minut po zahájení experimentu se objeví bílý prstenec niti, jehož tvorba indikuje přítomnost proteinu.
Semikvantitativní metody zahrnují:
- způsob stanovení proteinu v testovacích proužcích moči;
- Brandberg-Roberts-Stolnikovova metoda.
Metoda stanovení podle Brandberg-Roberts-Stolnikovovy metody je založena na Gellerově metodě, ale umožňuje přesněji odhadnout množství proteinu. Při provádění této metody s několika ředěními moči se v časovém intervalu 2–3 minuty od začátku testu objeví vláknitý proteinový kruh.
V praxi se jako indikátor používá metoda testovacích proužků s naneseným barvivem bromofenol blue. Nedostatek testovacích proužků je selektivní na albumin, což vede ke zkreslení výsledku v případě zvýšení koncentrace globulinu nebo jiných proteinů v moči.
Nevýhody způsobu také zahrnují relativně nízkou citlivost testu na protein. Testovací proužky začínají reagovat na přítomnost proteinu v moči při koncentraci proteinu vyšší než 0,15 g / l.
Kvantitativní metody hodnocení lze podmíněně rozdělit na:
Způsoby jsou založeny na vlastnostech proteinů snížit rozpustnost za působení vazebného činidla s tvorbou špatně rozpustné sloučeniny.
Látky způsobující vazbu bílkovin mohou být:
- kyselina sulfosalicylová;
- kyselina trichloroctová;
- benzethonium chlorid.
Na základě výsledků zkoušek se vyvodí závěry založené na stupni zeslabení světelného toku ve vzorku se suspenzí ve srovnání s kontrolním vzorkem. Výsledky této metody nelze vždy přičítat spolehlivým, a to z důvodu rozdílů v podmínkách provádění: rychlosti míchání reaktantů, teploty, kyselosti média.
Účinek na hodnocení příjmu léků den před provedením testů s použitím těchto metod nelze provést:
- antibiotika;
- sulfonamidy;
- léky obsahující jód.
Metoda odkazuje na dostupnou cenu, což umožňuje její široké použití při screeningu. Přesnější výsledky lze však získat použitím dražších kolorimetrických technik.
Citlivé metody, které přesně určují koncentraci proteinu v moči, zahrnují kolorimetrické metody.
Můžete to udělat s vysokou přesností:
- biuretová reakce;
- technika Lowry;
- Barvicí techniky, které používají barviva, která tvoří komplexy s bílkovinami moči, které se vizuálně liší od vzorku.
Kolorimetrické metody detekce proteinu v moči
Metoda se týká spolehlivého, vysoce citlivého, umožňujícího stanovit v albuminu moči, globuliny, paraproteiny. Používá se jako hlavní metoda objasnění výsledků kontroverzních testů, stejně jako denní bílkoviny moči u pacientů s nefrologickými odděleními nemocnic.
Ještě přesnějších výsledků lze dosáhnout metodou Lowry, která je založena na biuretové reakci, jakož i Folinové reakci, která rozpoznává tryptofan a tyrosin v molekulách proteinů.
Pro vyloučení možných chyb je vzorek moči purifikován dialýzou z aminokyselin, kyseliny močové. Chyby jsou možné s použitím salicylátů, tetracyklinů, chlorpromazinu.
Nejpřesnější způsob stanovení proteinu je založen na jeho vlastnostech vázat se na barviva, která se používají:
- ponso;
- Coomassie brilantní modrá;
- pyrogalická červená.
Během dne se množství bílkovin vylučovaných močí liší. K objektivnějšímu posouzení úbytku bílkovin v moči zavést koncept denního proteinu v moči. Tato hodnota se měří vg / den.
Pro rychlé zhodnocení denního proteinu v moči se stanoví množství bílkovin a kreatininu v jediné dávce moči, potom se poměr protein / kreatinin vypočítá na základě ztráty bílkovin za den.
Metoda je založena na skutečnosti, že rychlost vylučování kreatininu močí je konstantní, nemění se během dne. U zdravého člověka je normální poměr bílkovin: kreatininu v moči 0,2.
Tato metoda eliminuje možné chyby, které mohou nastat při sběru denního moči.
Kvalitativní testy častěji než kvantitativní testy dávají falešně pozitivní nebo falešně negativní výsledky. Chyby se vyskytují v souvislosti s medikací, stravovacími návyky, fyzickou aktivitou v předvečer analýzy.
Dekódování tohoto kvalitativního testu se provádí vizuálním stanovením zákalu ve zkumavce ve srovnání s výsledkem zkoušky s kontrolou:
- slabá pozitivní reakce se odhaduje jako +;
- pozitivní ++;
- prudce pozitivní +++.
Gellerův kruhový test přesněji vyhodnocuje přítomnost proteinu v moči, ale neumožňuje kvantifikaci proteinu v moči. Gellerův test, stejně jako test kyseliny sulfosalicylové, poskytuje pouze hrubou představu o obsahu bílkovin v moči.
Metoda umožňuje kvantitativní, ale příliš časově náročné, nepřesné stanovení stupně proteinurie, protože se silným zředěním klesá přesnost stanovení.
Pro výpočet proteinu je třeba násobit stupeň ředění moči o 0, 033 g / l:
Test nevyžaduje zvláštní podmínky, tento postup je snadné udělat doma. K tomu je třeba testovací proužek snížit na 2 minuty do moči.
Výsledky budou vyjádřeny počtem plusy na proužku, jehož dekódování je obsaženo v tabulce:
- Výsledky testu odpovídající hodnotám do 30 mg / 100 ml odpovídají fyziologické proteinurii.
- Hodnoty na testovacích proužcích 1+ a 2 ++ ukazují na významnou proteinurii.
- Hodnoty 3 +++, 4 ++++ jsou označeny patologickou proteinurií způsobenou onemocněním ledvin.
Testovací proužky mohou pouze určit množství zvýšeného proteinu v moči. Pro přesnou diagnózu nejsou použity, a ještě více, takže nemohou říci, co to znamená.
Nedovolte, aby testovací proužky dostatečně posoudily množství bílkovin v moči u těhotných žen. Spolehlivější metodou stanovení je stanovení proteinu v denní moči.
Stanovení proteinů v moči pomocí testovacích proužků:
Denní bílkoviny v moči jsou přesnější diagnózou stanovení funkčního stavu ledvin. K tomu je třeba shromáždit veškerou moč vylučovanou ledvinami denně.
Obsah bílkovin v moči lze zjistit poměrem bílkovin: kreatinin, data jsou uvedena v tabulce:
Platné hodnoty pro poměr protein / kreatinin jsou údaje v tabulce:
Při ztrátě více než 3,5 g proteinu denně se tento stav nazývá masivní proteinurie.
Pokud je v moči hodně bílkovin, je nutné po 1 měsíci, po 3 měsících, provést opakované vyšetření podle výsledků, které určují, proč je norma překročena.
Příčiny zvýšené bílkoviny v moči je jeho zvýšená produkce v těle a zhoršená funkce ledvin, rozlišuje se proteinurie: t
- fyziologické - menší odchylky od normy jsou způsobeny fyziologickými procesy, spontánně vyřešeny;
- patologické změny jsou způsobeny v důsledku patologického procesu v ledvinách nebo jiných orgánech těla bez postupné léčby.
Mírné zvýšení proteinu lze pozorovat při hojné výživě proteinů, mechanických popáleninách, poranění, doprovázeném zvýšenou produkcí imunoglobulinů.
Mírná proteinurie může být způsobena fyzickou námahou, psycho-emocionálním stresem nebo užíváním některých léků.
Fyziologická proteinurie je nárůst proteinů v moči u dětí v prvních dnech po porodu. Po týdnu života je však obsah bílkovin v moči dítěte považován za odchylku od normy a naznačuje vyvíjející se patologii.
Onemocnění ledvin, infekční onemocnění jsou také někdy doprovázena výskytem bílkovin v moči.
Tyto stavy obvykle odpovídají mírnému stupni proteinurie, jsou přechodnými jevy, rychle přecházejí na sebe, aniž by vyžadovaly zvláštní léčbu.
Závažnější stavy, závažná proteinurie je zaznamenána v případě:
- glomerulonefritida;
- diabetes;
- srdeční onemocnění;
- rakovina močového měchýře;
- mnohočetný myelom;
- infekce, poškození léčiva, onemocnění polycystických ledvin;
- vysoký krevní tlak;
- systémový lupus erythematosus;
- Goodpasture syndrom.
Střevní obstrukce, srdeční selhání a hypertyreóza mohou způsobit stopy bílkovin v moči.
Odrůdy proteinurie se klasifikují několika způsoby. Pro kvalitativní hodnocení proteinů lze použít klasifikaci Yaroshevsky.
Systematikou Yaroshevsky, vytvořený v roce 1971, rozlišuje proteinurii:
- renální - což zahrnuje porušení glomerulární filtrace, uvolnění proteinu z tubulů, nedostatek re-adsorpce proteinů v tubulech;
- prerenal - vyskytuje se mimo ledviny, vylučování hemoglobinu, bílkovin, které se vyskytují v krvi v důsledku mnohočetného myelomu;
- Postrenální - vyskytuje se v místě močového ústrojí po ledvinách, vylučování bílkovin do destrukce močových orgánů.
Pro kvantitativní vyhodnocení toho, co se děje, jsou izolovány podmíněně stupně proteinurie. Je třeba mít na paměti, že mohou snadno přejít do těžšího bez léčby.
Nejtěžší stadium proteinurie se vyvíjí se ztrátou více než 3 g proteinu denně. Ztráta proteinu od 30 mg do 300 mg denně odpovídá mírnému stádiu nebo mikroalbumurii. Až 30 mg proteinu v denní moči znamená mírnou proteinurii.
Proteinová norma v moči kolik?
- Normální protein v moči prakticky chybí (méně než 0,002 g / l). V některých případech se však malé množství proteinu může objevit v moči u zdravých jedinců po požití velkého množství potravy pro bílkoviny v důsledku chlazení, emočního stresu, prodloužené fyzické námahy (tzv. Pochodové proteinurie).
Výskyt významného množství proteinu v moči (proteinurie) je patologií. Příčinou proteinurie může být onemocnění ledvin (akutní a chronická glomerulonefritida, pyelonefritida, těhotná nefropatie atd.) Nebo močové cesty (zánět močového měchýře, prostaty, močovodů). Renální proteinurie může být organická (glomerulární, tubulární a nadměrná) a funkční (febrilní proteinurie, ortostatická u adolescentů, při překrmování kojenců, u novorozenců). Funkční proteinurie není spojena s renální patologií. Denní množství proteinu se liší u pacientů od 0,1 do 3,0 g nebo více. Složení proteinů v moči se stanoví elektroforézou. Vzhled proteinu Bens-Jones v moči je charakteristický pro myelom a Waldenstromovu makroglobulinemii, # 223; 2 mikroglobuliny v případě poškození renálních tubulů.
SG Specifická hmotnost. Snížení specifické hmotnosti indikuje snížení schopnosti ledvin koncentrovat moč a odstraňovat toxiny z těla, což se děje v případě selhání ledvin. Zvýšení specifické hmotnosti je spojeno s velkým množstvím cukru v moči, solí. Je třeba poznamenat, že není možné vyhodnotit specifickou hmotnost pouze pro jeden test moči, mohou se vyskytnout náhodné změny, je nutné opakovat analýzu moči 1-2 krát.
Protein Protein v moči - proteinurie. Příčinou proteinurie může být poškození ledvin při nefritidě, amyloidóze a poškození jedy. Protein v moči se také může objevit v důsledku onemocnění močových cest (pyelonefritida, cystitida, prostatitis).
Glukóza Glukóza (cukr) v moči - glykosurie - nejčastěji v důsledku diabetu. Vzácnější příčinou je porážka renálních tubulu. Je velmi rušivé, pokud se spolu s cukrem v moči zjistí tělesa ketonů. To se děje s těžkým, nevyrovnaným diabetes mellitus a je předzvěstí nejtěžších komplikací diabetu - diabetické kómy.
Bilirubin, Urobilinogen Bilirubin a urobilin jsou stanoveny v moči v různých formách žloutenky.
Erytrocyty Erytrocyty v moči - hematurie. To se děje buď s porážkou samotných ledvin, nejčastěji se zánětem, nebo u pacientů s onemocněním močových cest. Pokud se například po nich pohybuje kámen, může poškodit sliznici, v moči budou červené krvinky. Rozpadající se nádor ledvin může také vést k hematurii.
Leukocyty Leukocyty v moči - leukocyturie, nejčastěji následkem zánětlivých změn v močovém traktu u pacientů s pyelonefritidou, cystitidou. Leukocyty jsou často určovány zánětem ženských pohlavních orgánů, u mužů, zánětem prostaty.
Cylindrs Válce jsou zvláštní mikroskopické struktury. Hyalinové lahve v množství 1-2 mohou být u zdravého člověka. Jsou tvořeny v renálních tubulech, jsou spolu přilepeny k proteinovým částicím. Nárůst jejich počtu, válce jiných typů (granulované, erytrocytární, mastné) však vždy indikují poškození ledvinové tkáně samotné. Existují válce v zánětlivých onemocněních ledvin, metabolické léze, jako je diabetes.
Informativní metoda a její limity. Informační obsah obecného testu moči pro rozpoznání specifických onemocnění ledvin je nízký, obvykle vyžaduje další, přesnější studie. Výzkum je však velmi důležitý, zejména při provádění preventivních studií, neboť umožňuje identifikovat časné známky onemocnění ledvin. Je také známo, že onemocnění ledvin se často skrývá a pouze studie moči jim umožňuje podezírat a provádět další nezbytné vyšetření.
Ve většině laboratoří, při zkoumání moči na bílkoviny, nejprve použít kvalitativní reakce, které nedetekují protein v moči zdravého člověka. Pokud je protein v moči detekován kvalitativními reakcemi, provede se kvantitativní (nebo semikvantitativní) stanovení. Současně jsou důležité vlastnosti použitých metod, které pokrývají různé spektrum uroproteinů. Při stanovení proteinu s použitím 3% kyseliny sulfosalicylové se tedy množství proteinu považuje za normální až do 0,03 g / l, přičemž při použití metody pyrogallolu se mez hodnot normálních proteinů zvýší na 0,1 g / l. V tomto ohledu je v analytické formě nezbytné uvést normální hodnotu proteinu pro metodu používanou laboratoří.
Při stanovení minimálního množství bílkovin se doporučuje provést opakovanou analýzu, v případě pochybností je třeba stanovit denní ztrátu bílkovin v moči. Normální denní moč obsahuje bílkoviny v malých množstvích. Za fyziologických podmínek je filtrovaný protein téměř kompletně reabsorbován epitelem proximálních tubulů a jeho obsah v denním množství moči se liší podle různých autorů od stop až po 20 50, 80 100 mg a dokonce 150 až 200 mg. Někteří autoři věří, že denní vylučování proteinu v množství 30 50 mg / den je pro dospělého fyziologickou normou. Jiní se domnívají, že vylučování proteinů v moči by nemělo překročit 60 mg / m2 tělesného povrchu denně, s výjimkou prvního měsíce života, kdy hodnota fyziologické proteinurie může být čtyřikrát vyšší než stanovené hodnoty.
Obecnou podmínkou vzniku bílkovin v moči zdravého člověka je jejich poměrně vysoká koncentrace v krvi a molekulová hmotnost nejvýše 100 200 kDa.